طراحی و به کارگیری روش rt-pcr elisa multiplex برای تشخیص عفونت همزمان hcv و hiv-۱

Authors

zahra khanlari

m.sc. student, department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mehrdad ravanshad

assistant professor, department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran manouchehr rasouli

assistant professor, department of immunology, professor alborzi clinical microbiology research center, shiraz university of medical sciences, shiraz, iran mazyar ziyaeyan

assistant professor, department of virology, professor alborzi clinical microbiology research center, shiraz university of medical sciences, shiraz, iran

abstract

هدف: علیرغم غربالگری خون های اهدایی با روش های حساس مبتنی بر شناسایی آنتی بادی، همچنان خطر انتقال عفونت های ویروسی وجود دارد. بنابراین طراحی روش های حساس مبتنی بر شناسایی اسید نوکلئیک مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این تحقیق طراحی روشی حساس تر در مرحله شناسایی نسبت به روش های معمول و همچنین تشخیص همزمان عفونت های ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت c در یک نمونه است. مواد و روش ها: پس از طراحی آغازگرها و پروب های اختصاصی دو ویروس و بهینه سازی روش واکنش زنجیره ای چندگانه، مرحله نشاندار کردن محصول با استفاده ازنوکلئوتیدهای متصل به دیگوگسی ژنین انجام شد. محصول به دست آمده ابتدا به دو قسمت مجزا تقسیم و پس از واسرشت شدن در شرایط قلیایی با پروب اختصاصی مجاور شد. پروب های حاوی بیوتین انتهایی پس از اضافه شدن به پلیت پوشش یافته با استرپت آویدین متصل شدند. پس از شستشو، آنتی بادی ضد دیگوگسی ژنین متصل به آنزیم آلکالن فسفاتاز به چاهک ها اضافه شد. در مرحله نهایی شستشو انجام و سوبسترا اضافه شد. با استفاده از روش رنگ سنجی نمونه های مثبت و منفی از نظر عفونت قابل شناسایی هستند. نتایج: 35 نمونه با روش طراحی شده مورد آزمایش قرار گرفتند، که شامل 27 نمونه مثبت و 8 نمونه منفی تأیید شده و 4 نمونه پانل استاندارد بودند. هیچ گونه نتیجه مثبت یا منفی کاذب مشاهده نشد. نتیجه گیری: روش طراحی شده دارای حساسیت و اختصاصیت قابل قبولی برای تشخیص عفونت ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت c در دوره پنجره می باشد به علاوه امکان کمی کردن روش وجود دارد، که در کنترل بیمار و پایش درمان مفید است. همچنین در کنار حساسیت بسیار بالا هزینه و زمان کمتری برای انجام آزمون نیاز است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

روش Multiplex RT-PCR در تشخیص عفونت همزمان ویروس‌های HIV-1 و HCV در نمونه‌های پلاسما

زمینه و هدف : از جمله مهم‌ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون، ویروس‌هایHIV-1 و HCV می‌باشند. به‌خصوص در حالت عفونت همزمان که از مشکلات بالینی قابل توجه در بیماران مصرف کننده فراورده‌های خونی است. این مطالعه به منظور توسعه روش Multiplex RT-PCR در تشخیص عفونت همزمان ویروس‌های HIV-1 و HCV در نمونه‌های پلاسما انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی به تشخیص همزمان ژنوم دو ویروس HIV-1 و ...

full text

روش multiplex rt-pcr در تشخیص عفونت همزمان ویروس های hiv-۱ و hcv در نمونه های پلاسما

زمینه و هدف : از جمله مهم ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون، ویروس هایhiv-1 و hcv می باشند. به خصوص در حالت عفونت همزمان که از مشکلات بالینی قابل توجه در بیماران مصرف کننده فراورده های خونی است. این مطالعه به منظور توسعه روش multiplex rt-pcr در تشخیص عفونت همزمان ویروس های hiv-1 و hcv در نمونه های پلاسما انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی به تشخیص همزمان ژنوم دو ویروس hiv-1 و hcv...

full text

به کارگیری آزمون RT-PCR جهت تشخیص قطعی آلودگی به ویروس HCV

    چکید ه   سابقه و هدف   علی‌رغم وجود تزریق خون به عنوان تنها راه نجات بیمار، عفونت‌های منتقله از راه خون از جمله ویروس هپاتیت C ، یکی از معضـلات بهداشتی در علم انتقال خون بوده که موجب عوارض و صرف بودجه‌های سنگین می‌گردد. هپاتیت C یک مشکل بهداشتی در دنیا است و در حال حاضر 200 میلیون نفر به آن مبتلا می‌باشند. کشور ما از نظر شیوع هپاتیت C جزو مناطق با شیوع کم می‌باشد، ولی میزان بروز موارد جدید ...

full text

a novel sensitive multiplex rt-pcr elisa method for detection of hiv-1/hcv co-infection

objective: despite sensitive antibody based blood donor screening, infection can be transmitted during window period. therefore sensetive methods bosed on nucleic acid tests (nats) have been considered. the aim of this project was to design a more sensitive method for detection of pcr products and diagnosis of hiv-1/hcv co-infection accurately. materials and methods: after designing specific p...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۱، شماره Spring & Summer ۲۰۰۸، صفحات ۰-۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023